2×QY Taq PCR Mix(QYR0502)
产品名称:2×QY Taq PCR Mix
货号:QYR0502
产品参数
规格:1.0 ml/支
保存条件:-20℃保存24个月。
适用范围:适用于常规PCR扩增。
产品简介
本产品包含高纯度Taq DNA聚合酶、dNTPs以及优化的缓冲体系,浓度为2×,只需要添加引物、模板和ddH2O即可进行PCR扩增,可有效扩增3kb以内的DNA片段。体系中包含有蓝色电泳指示剂,可在扩增完成后直接上样进行电泳检测,其迁移速度在1%TAE琼脂糖凝胶中与500bp双链DNA片段相近。
使用本产品扩增的PCR产物3’ 端带有一个突出的“A”碱基,纯化后可直接用于TA克隆。
使用方法
操作示例
1. 按照下表,于冰上配制PCR反应体系:
组分
25 μl体系
50 μl体系
终浓度
2×QY Taq PCR Mix
12.5 μl
25.0 μl
1×
Forward Primer (10 μM)
1.0 μl
2.0 μl
0.4 μM
Reverse Primer (10 μM)
1.0 μl
2.0 μl
0.4 μM
Template DNA(1)
As require
As require
-
ddH2O
Up to 25 μl
Up to 50 μl
-
(1)模板推荐量:
基因组DNA:10~1000 ng; 质粒DNA:1~30 ng;
cDNA:1~2 μl(不超过PCR反应总体积的1/10)。
注:以上为推荐的模板使用量,实际反应条件因模板、引物等的结构不同会存在一些差异,可根据模板、引物、目的片段的特点设定最佳反应条件,并根据比例放大或缩小反应体系。
2. 推荐的PCR程序
步骤
温度
时间
循环数
预变性
95℃
3 min
1
变性
94℃
25 s
30~35 cycles
退火
55~64℃
25 s
延伸
72℃
10~15 s/kb
终延伸
72℃
1~5min
1
-
4℃
Hold
-
注意事项
1. 请使用高质量的模板进行扩增;
2. PCR Mix应避免反复冻融,短期内多次使用可置于4℃保存。
3. 本产品不可用于细菌16S鉴定。
注:本产品仅用于科研用途,不用于诊断和治疗。
