ECL 标准型化学发光液

货号：QYR6998

规格：50+50ml；250+250ml；5+5ml

保存条件：4℃，密封避光保存一年以上。短期可放置室温。

 一. 产品描述：

   ECL 标准型发光液用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶HRP的抗体及其关联的抗原，可实现皮克级的免疫印迹检测。为A，B双组份，试剂A主要成分为鲁米诺，试剂B含有H2O2。

二.产品特点：

（1）可使用的抗体稀释倍数，按厂家说明书即可，无需调试。

（2）可直接替代其它公司的ECL发光底物，操作步骤无需进行特别优化

（3）灵敏度高，可检测皮克级的蛋白

（4）信号持续时间更长，光信号持续时间长达3-5小时

（5）普遍适用于CCD成像仪，X射线胶片、或激光成像仪

三. 使用方法:

1. 执行常规SDS-PAGE、转膜和Western Blot操作。

2. Western Blot最后一次洗膜的同时新鲜配制发光工作液：分别取等体积的溶液A和B，放入干净容器中混合。建议现用现配，室温放置数小时后仍可使用但灵敏度略有降低。

3. 用镊子取出膜，搭在滤纸上沥干洗液但勿使膜完全干燥。将膜完全浸入发光工作液（1mL发光工作液/10cm2膜）中，与发光工作液充分接触，室温孵育3分钟。

4. 用镊子夹起膜，搭在滤纸上沥干发光工作液。但勿洗去发光液。

5. 通过成像设备或放射自显影胶片获取信号。对于一个未知的信号，可自动曝光，或者调节不同曝光时间来获得最佳结果。

四. 常见问题。

问题	可能原因	处理办法
高背景	抗体浓度高	稀释一抗或二抗，优化浓度。优先考虑稀释二抗
	封闭不完全	注意封闭液脱脂奶粉，或者BSA含量
	洗膜不充分	用含吐温的洗膜液多洗几次
	抗体特异性差	更换抗体，优先考虑更换一抗
不规则黑点	模上有气泡	赶出气泡
	设备拍照底板有污渍	擦拭干净，注意膜上也不要有残留凝胶块等

五. 注意事项：

（1）吸取时必须更换吸头，避免A和B互相污染。污染后会逐渐失效。

（2）长时间曝光或蛋白过量，将加深背景并使条带强弱变化失去线性关系。曝光不足则条带模糊。

（3）最好使用平头镊子夹膜，避免在膜上留下划痕

（4）NaN3能抑制HRP活性，回收抗体应避免使用含NaN3的稀释液或者保存液

（5）戴手套操作，避免直接接触皮肤。

（6）本品仅用于科研。