酵母菌落 PCR 裂解液

货号：QYR1038

规格：100ml

保存条件：RT

本裂解液专为酵母菌落 PCR（Colony PCR）设计，采用优化的 NaOH–Triton X-100 体系，可高效裂解酵母细胞壁及细胞膜，释放基因组 DNA 或质粒模板，无需繁琐的 DNA 提取步骤，直接用于 PCR 扩增。适用于酿酒酵母（S. cerevisiae）、毕赤酵母（P. pastoris）等常见酵母菌株，兼容常规 Taq 酶及高保真酶体系。

使用方法例

1. 挑取单克隆

用无菌 tip 或牙签挑取 直径 1~2 mm 的酵母单菌落（约米粒大小，切勿过量）。

2. 重悬裂解

将菌落转入含 20~30 μL 裂解液的 0.2 mL PCR 管中，轻轻吹打混匀（可见菌体分散即可）。

3. 热裂解（核心步骤）

95℃ 加热 5~10 min（热循环仪或金属浴）

→ 彻底裂解细胞壁，变性蛋白并释放核酸

4. 骤冷终止

立即冰浴 2 min​

→ 防止 DNA 高温降解，中和碱性环境

5. 离心取上清

瞬时离心（12,000 ×g，10 sec）

吸取 1~2 μL 上清​ 作为 PCR 模板（勿吸沉淀）

6. PCR 扩增

按常规体系配制 PCR 反应液，加入模板后运行程序：

预变性：94~95℃ 3~5 min（关键！确保完全变性）

循环：按引物 Tm 值设定退火温度（通常 25~35 个循环）

延伸：72℃ 1 min/kb

适用场景：科研实验专用，非临床用途