AI/PO双染试剂盒（QYR76502）

产品名称：AI/PO双染试剂盒；吖啶橙/碘化丙啶双染试剂盒

英文名称：AO/PI Double Staining Apoptosis Detection Kit

货号：QYR76502

 

产品参数：

规格：50T（5ml），100T（10ml），250T（25ml）

储存温度：-20ºC避光保存

注意：

1. 以96孔板为例，按照每个样品使用100μl AO/PI细胞活性检测试剂计算，本试剂盒每1ml可以进行10次检测。

2. 可根据用户需求定制个性化浓度的染色剂。

 

产品简介：

AO/PI双染试剂盒是由吖啶橙（Acridine orange, AO）染色液和碘化丙锭（Propidium iodide, PI）染色液优化比例混合而成，基于DNA探针双染细胞核，快速、便捷检测细胞活性的试剂盒。

AO能渗透活细胞并与核酸结合，与双链DNA结合会使AO发出绿色荧光，与单链DNA或RNA结合会发出红色荧光。而PI是一种非细胞膜通透性荧光染料，即不能穿过具有生物活性的细胞质膜，只能对于坏死细胞因为其细胞膜缺乏完整性而能到达细胞核，并嵌入坏死细胞的DNA双螺旋形成PI-DNA复合物从而产生红色荧光，因此PI仅能对坏死细胞染色，因此被用来区分正常细胞与坏死细胞。须特别注意凋亡细胞会因为其细胞膜的完整性，而无法被PI染色，仅在凋亡后期发生继发性坏死时，才能被PI染色。

 

使用说明：（仅供参考）

（一）悬浮细胞染色

1. 细胞按照实验设计进行一定处理后，计数。取适当细胞600×g室温离心5分钟，弃上清，加入PBS洗涤1-2次。

2. 加入适当体积的AO/PI细胞活性检测试剂重悬细胞，使细胞密度为100万-2000万/ml。

3. 37ºC孵育细胞10-20分钟，不同的细胞最佳孵育时间不同。以10分钟作为初始孵育时间，根据实验的细胞进行优化得到最佳的效果。

4. 孵育结束，600×g室温离心5分钟，沉淀细胞。弃上清，注意尽量保留好细胞沉淀。

5. 缓慢加入PBS重悬细胞，600×g室温离心5分钟，沉淀细胞。弃上清，注意尽量保留好细胞沉淀。

6. 用适量PBS重悬细胞，将细胞转移至多孔板、细胞培养皿或者载玻片上，即可在荧光显微镜或激光共聚焦显微镜下观察。

（二）贴壁细胞染色

本步骤以96孔板为例。其它孔板检测试剂的用量参考96孔板的用量进行适当调整。

1. 细胞经过处理后，吸去培养液，使用PBS洗涤1-2次。

2. 每孔加入100μl AO/PI细胞活性检测试剂。

3. 37ºC孵育细胞10-20分钟，不同的细胞最佳培养时间不同。以10分钟作为初始孵育时间，根据实验的细胞进行优化得到最佳的效果。

4. 吸去AO/PI细胞活性检测试剂，用PBS洗涤1-2次，然后加入适量PBS即可在荧光显微镜或激光共聚焦显微镜下观察。

 

注意事项：

1. 荧光染料均存在淬灭问题，请注意避光，以减缓荧光淬灭。

2. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。