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蛋白A/G琼脂糖凝胶 Protein A/G Agarose PAG-agarose 
   目录号 QY2003    
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2ml 400.00 400.00
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10ml 1200.00 1200.00
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50ml 5200.00 5200.00
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200ml 11350.00 11350.00
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图片描述:
200ml
文件与质量管理
COA Datasheet
商品基本信息:

蛋白A/G琼脂糖凝胶

 

名称:蛋白A/G琼脂糖凝胶(PAG-琼脂糖凝胶)

英文名称:Protein AG Agarose, PAG-agarose

目录号:QY2003

规格:2ml,10ml,50ml,200ml(包含保护液,蛋白A/G琼脂糖凝胶约占总体系的25%)

储存形式:3倍凝胶储存液浸泡存于4

 

产品介绍

蛋白A/G琼脂糖凝胶(PAG-琼脂糖凝胶)是重组蛋白A蛋白G融合蛋白(r-PAG)与琼脂糖凝胶微球(Agarose)偶联,制备的抗体纯化(亲和层析)介质。与单独的蛋白A或蛋白G琼脂糖凝胶相比,本品具有更宽广的结合范围,可以与人类、小鼠、大鼠、兔等多物种各亚型IgG结合。本品适用于IP实验及抗体纯化,包括人类IgG, 小鼠IgG, IgG单抗和多抗的纯化和检测。本品结构稳定,结合IgG效率高,对纯化体系pH值要求不严格,允许在pH5.0-8.0之间进行结合。

 

产品性能

性能

指标

基质

6%琼脂糖微球

配基

蛋白A蛋白G融合蛋白

配基密度

≥7mg PAG/ml 琼脂糖微球

载量

7-10mg IgG/ml 琼脂糖微球

粒径

45-165μm

推荐流速/最大流速

100/750 cm/h

pH稳定范围-工作/清洗

3~9/2~10

储存缓冲液

PBS+20%乙醇

储存温度

4

保质期

1

 

 

 

实验例

实验名称:IP/免疫沉淀

试剂及耗材准备:

IP缓冲液:25mM Tris, 150mM NaCl, pH7.2

洗脱缓冲液:100mM Glycine, pH2.7

中和缓冲液:1M Tris-HCl, pH9.0

细胞裂解液(抗原样本)

 

实验方案

本实验方案使用50ul PAG-琼脂糖凝胶(200ul PAG-琼脂糖凝胶混悬液),可结合25-250ug抗体。具体操作中,可根据抗原、抗体的加样量及抗原与抗体的结合能力,调整所使用的PAG-琼脂糖凝胶混悬液、IP缓冲液、洗脱缓冲液体积。

  1. 1.5ml离心管中加入50-1000ul抗原样本和一定浓度的抗体。4孵育过夜。
  2. 在新的离心管中加入200ul PAG-琼脂糖凝胶混悬液,1000g4离心5min,弃上清。
  3. PAG-琼脂糖凝胶中加入0.5ml IP缓冲液,用上述条件离心,弃上清。重复2次。
  4. 将抗原-抗体复合物加入PAG-琼脂糖凝胶中,室温旋转孵育2h
  5. 将孵育好的琼脂糖凝胶-免疫复合物用上述条件离心,弃上清。
  6. 加入0.5ml IP缓冲液,用上述条件离心,弃上清。重复3-4次。
  7. 加入50ul洗脱缓冲液,室温孵育5min。用上述条件离心,收集上清。重复1次。
  8. 合并两次离心收集的上清,加入10ul中和缓冲液,将pH调整至7.0左右。
  9. SDS-PAGE电泳检测目的蛋白。或将目的蛋白进行透析、脱盐,供其他实验使用。
其他技术信息

更多信息请下载和查阅产品说明书。

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