中文名:X-α-gal

英文名:X-α-gal

CAS:107021-38-5

级别:试剂级别

分子量:408.64

分子式:C14H15BrCNO6

纯度:N/A

储存条件:-20℃

产品简介

中文别名：5-溴-4-氯-3-吲哚基-alpha-D-吡喃半乳糖苷

英文别名：X-α-Gal, X-alpha-Gal, 5-Bromo-4-chloro-3-indolyl-α-D-galactoside

溶 解 性：溶于二甲基甲酰胺（DMF）、甲醇；1%甲醇溶液无色，清澈

关于X-α-gal：

    X-α-gal是酵母半乳糖苷酶（MEL1）的显色底物，MEL1是GAL4酵母双杂交系统的一个报告基因，该基因受GAL4调控。MEL1编码的分泌型的α-半乳糖苷酶可水解无色的X-α-gal，形成蓝色产物。MEL1基因激活后，X-α-gal检测阳性克隆表达的α-半乳糖苷酶，阳性克隆直接在含有X-α-gal的固体培养基上呈蓝色。因此无需裂解细胞，费时费力的检测β-半乳糖苷酶报告基因，只需通过蓝白颜色筛选，即可快速和简便地识别阳性克隆。

X-α-Gal的用途：

    1. 用于筛选含X-α-半乳糖苷酶基因的阳性酵母或细菌菌株。在固体培养基上直接检测酵母双杂交相互作用。

    2. 用于区分肠杆菌科内的不同菌种，以及区分双歧杆菌和乳酸菌；

    3. 在组织化学中用于酶活性的检测；

X-α-Gal的使用方法：

一、涂布于预制平板：

    1.储存液配制：溶解24 mg X-α-gal于6 mL DMF，终浓度为4 mg/mL。

    2. 涂布200ul（15cm） 或者100ul（10cm）X-α-gal储存液于预制平板上；

    3. 置于37℃培养箱至液体被吸收（DMF挥发性低，最长可放4小时）；

    4. 将转化细菌或酵母涂于平板上，于37℃或30℃培养直至蓝色菌斑出现。

二、直接加入培养基中：

    1. 储存液配制：溶解60 mg X-α-gal于3 mL DMF，终浓度为20 mg/mL。

    2. 将已灭菌固体培养基冷却至50-55 ℃；

    3. 加入2-10 ml X-α-Gal储存液，混匀，快速倒平板。

携带MEL1基因的酵母菌株：

    Y2HGold、Y190、AH190、Y187、PG69-2A

X-Gal与X-α-gal不同：

    X-Gal是E.coli β-半乳糖苷酶（LacZ）的反应底物，而X-α-gal是酵母α-半乳糖苷酶（MEL1）的反应底物。X-α-gal用作酵母双杂交系统中蓝白筛选的筛选标记。