English
   中文版
邮箱: sinaone_vip@163.com    电话: 01056545366
首页 > 启研技术服务 > 细胞研究 >
CRISPR/Cas9介导基因敲除细胞系建立 目录号:QY-19

CRISPR/Cas9(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)是一种由RNA指导的Cas9核酸酶对靶向基因进行编辑的技术,其原理是crRNA( CRISPR-derived RNA )通过碱基配对与 tracrRNA (trans-activating RNA )结合形成 tracrRNA/crRNA 复合物,此复合物引导核酸酶Cas9蛋白,将其带到与crRNA 配对的靶点进行特异性识别,从而对特定基因位点进行切割导致突变。并将Cas9 核酸酶带到基因组上的具体靶点,并在Cas9 蛋白介导与crRNA 配对靶位点序列进行特异性识别,从而对特定基因位点进行切割导致突变。

一、服务内容

1. sgRNA设计和高效sgRNA筛选;

2. sgRNA表达载体构建;

3. sgRNA和Cas9质粒共转染细胞和敲除细胞株筛选及鉴定。

二、收费标准

服务项目

内容说明

收费标准¥

实验周期

sgRNA设计和筛选

针对特异性基因设计多条sgRNA序列

5000

 1

高效sgRNA筛选载体构建

选择敲除效率最高的两条sgRNA构建表达载体

50000/基因

4-6

基因敲除细胞系的建立

(提供1-2个敲除基因型细胞系和WT细胞系)

使用sgRNA和Cas9共转染细胞并对目的基因进行敲除

250000/基因/细胞系

3-5

三、实验要求

1. 客户提供培养状态良好的目的细胞

2. 客户提供待敲除基因信息,包括基因名称,NCBI号等;

三、终产品

1. 完整实验报告

2. sgRNA筛选结果(含sgRNA序列和PCR鉴定结果等)

3. 基因敲除细胞系(细胞数目>1*106)(含基因敲除鉴定结果)

技术文件下载